固相萃取儀基本原理及操作流程簡(jiǎn)略表明

        固相萃取就是這種制樣設(shè)備。它應(yīng)用液固相色譜的基本理論，選擇選擇性吸收和增白方法對(duì)樣品進(jìn)行包合、分離、清洗，使樣品更加純凈，從而減少殘留物的干擾在檢驗(yàn)產(chǎn)品上進(jìn)行檢驗(yàn)，進(jìn)一步提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。
        固相萃取的原理是采用選擇性吸收和選擇性增白的液相色譜分離的基本原理。比較常見(jiàn)的方法是將待測(cè)化學(xué)物質(zhì)按催化劑載體儲(chǔ)存在液體試樣的水溶液中，然后用中等抗壓強(qiáng)度的有機(jī)溶劑洗去殘留物，再用少量有機(jī)溶劑使待測(cè)化學(xué)物質(zhì)快速變白，進(jìn)而超越清洗和萃取目的快速分離。固相萃取也可以類似于這種簡(jiǎn)單的色譜分析來(lái)分離整個(gè)過(guò)程。
         1. SPE 小柱或膜的選擇
        SPE 小柱或膜的尺寸和規(guī)格應(yīng)由樣品中分析物的濃度值決定。對(duì)于濃度值較低的人體樣品，通常應(yīng)使用較少的固定相填料來(lái)純化大體積樣品。
         2. 活動(dòng)
        純化前，加入填充小柱的溶劑清洗小柱或用5-10ml溶劑清洗濾膜，保持SPE填料濕潤(rùn)。包裝材料的干燥會(huì)降低樣品的保留值。小柱子的不同干燥程度也會(huì)損害利用率的再現(xiàn)性。先加入乙醇等水溶性溶劑清洗填料。由于乙醇可以潤(rùn)濕催化劑載體的表面并滲透到非光學(xué)活性硅橡膠的鍵合中，所以硅橡膠更容易被水潤(rùn)濕；然后加水或緩沖液清洗。創(chuàng)造與測(cè)試樣品溶劑相容的自然環(huán)境，提高利用率。
         3. 加載樣本
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         (1)用0.1mol/L酸或堿調(diào)至pH9，抽濾上層提純；
         (2)用乙醇、乙腈沉淀蛋白質(zhì)后，取上清，用水或緩沖液稀釋純化；
         (3)用酸或無(wú)機(jī)鹽沉淀蛋白質(zhì)，取上清，調(diào)節(jié)pH值，純化；
         (4)超聲15分鐘后加水和緩沖液，取上清進(jìn)行純化。水流速應(yīng)控制在1ml/min，過(guò)快的水流速不利于被測(cè)物與靜止的緊密結(jié)合。
         4. 漂洗
        反相 SPE 的清洗溶劑多為水或緩沖液?？稍谇逑匆褐屑尤肷倭咳軇?、無(wú)機(jī)鹽或調(diào)節(jié)pH值。加入小柱的清洗液不要超過(guò)一根小柱的容量，SPE過(guò)濾膜為5-10ml。
         5. 粉飾
        應(yīng)使用5～10ml離子強(qiáng)度差但能沖洗被測(cè)物的洗白溶劑。如果你想要更高的靈敏度，你應(yīng)該先蒸發(fā)洗白液，然后用液相重組剩余的資產(chǎn)和樣品。身體樣本在洗滌后含有水分，因此可以使用冷凍干燥。儲(chǔ)存能力較差的SPE填料可用小體積、較差的洗白液洗滌分析物，然后使用高旋光性的HPLC分析柱如C18柱對(duì)洗白的物質(zhì)進(jìn)行分析。如果分析物可以被電離，則可以通過(guò)調(diào)節(jié)pH值來(lái)抑制受試品的電離，以提高分析物在反相SPE填充材料中的儲(chǔ)存。在增白過(guò)程中，調(diào)節(jié)pH值使其電離，使用不良溶劑進(jìn)行增白，收集洗白液后，調(diào)節(jié)pH值以提高HPLC分析中的實(shí)際分離效果。在整個(gè)刷白過(guò)程中，要減慢水流速度，用2次小流量刷白代替1次大流量刷白，利用率更高。